初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo)：抗血清的制備

　　抗血清的制備

　　(1)免疫動(dòng)物的選擇：

　　①抗原與免疫動(dòng)物的種屬差異越遠(yuǎn)越好。

　　②動(dòng)物必須適齡、健壯、無(wú)感染、體重合乎要求。

　?、坩槍?duì)不同性質(zhì)的免疫原，選用相應(yīng)的動(dòng)物。甾類(lèi)激素多用家兔;酶類(lèi)多用豚鼠。

　　④抗血清要求為R(rabbit)型或H(horse)型血清。

　　此外需要制備大量免疫血清時(shí)，應(yīng)選用馬、綿羊等大動(dòng)物;若需要量不多，則選用家兔、豚鼠和雞等。

　　(2)免疫方法及途徑

　　①免疫原的注射劑量：應(yīng)考慮抗原性強(qiáng)弱、分子量大小、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間。

　?、诿庖咄緩剑和ǔＳ徐o脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。

　?、勖庖叻桨福焊鶕?jù)設(shè)計(jì)的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類(lèi)來(lái)制定免疫方案?？刹捎萌棵庖叻?、微量免疫法或混合免疫法。

　?、芸贵w產(chǎn)生階段：可分靜止期(約2天，血中尚無(wú)抗體);指數(shù)期(約4天左右，抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約2～4周，抗體保持一個(gè)穩(wěn)定水平);下降期(約幾個(gè)月后，此時(shí)抗體緩慢下降)四個(gè)階段。

　　(3)抗血清的鑒定和保存

　　1)特異性抗體的鑒定：

　　①抗體特異性鑒定：常采用雙向免疫擴(kuò)散法。

　?、诳贵w的效價(jià)的鑒定：常采用雙向免疫擴(kuò)散法。一是僅稀釋抗血清，與同一濃度抗原反應(yīng);另一是抗血清、抗原同時(shí)稀釋作棋盤(pán)滴定。

　?、劭贵w的純度鑒定：常用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法鑒定。

　　2)抗血清的保存：

　?、偈?℃保存，通?？杀４?個(gè)月～半年，效價(jià)高時(shí)可保存一年左右;

　　②是-20℃～-40℃低溫保存，可保存5年左右，但需防止反復(fù)凍融;

　?、鄯N是真空冰凍干燥保存，可保存5～10年。

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